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3-20
摘要基于高效質(zhì)粒純化與電穿孔技術(shù)的骨骼肌轉(zhuǎn)基因方法。通過(guò)優(yōu)化質(zhì)粒提取流程，獲得高純度環(huán)狀DNA；結(jié)合威尼德電穿孔儀參數(shù)調(diào)控，實(shí)現(xiàn)外源基因在小鼠骨骼肌組織中的高效遞送。實(shí)驗(yàn)顯示，電穿孔后72小時(shí)GFP陽(yáng)性細(xì)胞率達(dá)（34.5±2.8）%，蛋白表達(dá)持續(xù)14天以上。該方法為基因治療及肌肉疾病研究提供了可靠技術(shù)平臺(tái)。引言骨骼肌組織因其再生能力強(qiáng)、細(xì)胞體積大的特點(diǎn)，成為基因治療研究的重要靶點(diǎn)。傳統(tǒng)病毒載體遞送存在免疫原性風(fēng)險(xiǎn)，而物理遞送方法如顯微注射效率較低。電穿孔技術(shù)通過(guò)...
3-20
摘要起搏基因質(zhì)粒的高效構(gòu)建方法及其在心肌細(xì)胞中的體外轉(zhuǎn)染機(jī)制。通過(guò)分子克隆技術(shù)構(gòu)建攜帶HCN4基因的重組質(zhì)粒，并利用電穿孔法優(yōu)化轉(zhuǎn)染條件。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，優(yōu)化后的轉(zhuǎn)染方案顯著提升了心肌細(xì)胞的基因表達(dá)效率，且未影響細(xì)胞活性。該研究為心臟起搏機(jī)制的體外模擬及基因治療提供了理論依據(jù)與技術(shù)參考。引言心臟起搏功能依賴于竇房結(jié)細(xì)胞的自主節(jié)律性，而超極化激活環(huán)核苷酸門控通道（HCN4）基因是調(diào)控這一過(guò)程的核心分子。近年來(lái)，基因編輯與體外轉(zhuǎn)染技術(shù)的發(fā)展為心臟疾病模型構(gòu)建及治療策略開(kāi)發(fā)提供了新思...
3-20
摘要近年來(lái)，樹(shù)突狀細(xì)胞（DC）腫瘤疫苗在免疫治療領(lǐng)域展現(xiàn)出重要潛力。本研究聚焦RNA修飾技術(shù)對(duì)DC疫苗功能的影響，通過(guò)優(yōu)化RNA轉(zhuǎn)染效率及穩(wěn)定性，探索其激活抗腫瘤免疫的分子機(jī)制。實(shí)驗(yàn)表明，化學(xué)修飾的RNA可顯著提升DC抗原呈遞能力，并通過(guò)動(dòng)物模型驗(yàn)證了疫苗的抑瘤效果。本研究為RNA修飾技術(shù)在腫瘤疫苗開(kāi)發(fā)中的應(yīng)用提供了理論依據(jù)。引言樹(shù)突狀細(xì)胞作為抗原呈遞的核心細(xì)胞，其腫瘤疫苗的研發(fā)是腫瘤免疫治療的重要方向。傳統(tǒng)DC疫苗依賴外源性抗原負(fù)載，存在遞送效率低、免疫原性不足等問(wèn)題。RN...
3-20
摘要低強(qiáng)度瞬態(tài)電磁場(chǎng)（LT-EMF）模型，探究其對(duì)細(xì)胞膜通透性的調(diào)控機(jī)制。實(shí)驗(yàn)采用威尼德電穿孔儀施加特定參數(shù)電磁脈沖，結(jié)合熒光標(biāo)記法分析細(xì)胞膜完整性及分子跨膜效率。結(jié)果顯示，LT-EMF可在不顯著影響細(xì)胞活性的前提下誘導(dǎo)可逆性膜穿孔，為基因遞送及藥物傳輸提供新型技術(shù)路徑。引言細(xì)胞膜穿孔技術(shù)是基因編輯、藥物遞送及分子生物學(xué)研究的核心工具。傳統(tǒng)電穿孔依賴高強(qiáng)度電場(chǎng)，易導(dǎo)致細(xì)胞不可逆損傷，限制其臨床應(yīng)用。近年來(lái)，低強(qiáng)度瞬態(tài)電磁場(chǎng)（LT-EMF）因其非熱效應(yīng)和可控性受到關(guān)注，但其誘導(dǎo)...
3-20
摘要豬瘟病毒抗性基因表達(dá)載體，利用電穿孔技術(shù)將其轉(zhuǎn)染至仔豬皮膚成纖維細(xì)胞中，評(píng)估轉(zhuǎn)染效率及抗病毒效應(yīng)。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，轉(zhuǎn)染后細(xì)胞中抗性基因mRNA及蛋白表達(dá)顯著上調(diào)，且對(duì)豬瘟病毒感染的抵抗力顯著增強(qiáng)。研究為抗病基因編輯動(dòng)物模型開(kāi)發(fā)提供了技術(shù)參考，并揭示了抗性基因在細(xì)胞內(nèi)的功能機(jī)制。引言豬瘟（ClassicalSwineFever,CSF）是由豬瘟病毒（CSFV）引起的高傳染性動(dòng)物疫病，對(duì)全球養(yǎng)豬業(yè)造成嚴(yán)重經(jīng)濟(jì)損失。傳統(tǒng)疫苗防控存在局限性，基因編輯技術(shù)為培育抗病動(dòng)物提供了新思路。...
3-19
摘要基因轉(zhuǎn)染人羊膜細(xì)胞（hAMCs）對(duì)顱腦創(chuàng)傷（TBI）大鼠海馬修復(fù)的調(diào)控機(jī)制。通過(guò)構(gòu)建大鼠TBI模型，移植過(guò)表達(dá)神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子的基因修飾hAMCs，結(jié)合行為學(xué)、分子生物學(xué)及組織學(xué)分析，發(fā)現(xiàn)干預(yù)組大鼠認(rèn)知功能顯著改善，海馬神經(jīng)元再生增強(qiáng)，凋亡通路受抑制。實(shí)驗(yàn)表明，基因修飾hAMCs可通過(guò)旁分泌與細(xì)胞直接整合協(xié)同促進(jìn)神經(jīng)修復(fù)，為TBI治療提供新策略。引言顱腦創(chuàng)傷（TBI）是導(dǎo)致神經(jīng)功能障礙的主要病因之一，其病理機(jī)制涉及神經(jīng)元凋亡、炎癥反應(yīng)及再生障礙。海馬區(qū)作為記憶與認(rèn)知功能的核心...
3-19
摘要多藥耐藥基因（MDR1）轉(zhuǎn)染至細(xì)胞因子誘導(dǎo)的殺傷細(xì)胞（CIK），探索其耐藥性增強(qiáng)機(jī)制及臨床應(yīng)用潛力。實(shí)驗(yàn)采用電穿孔技術(shù)實(shí)現(xiàn)基因轉(zhuǎn)染，并通過(guò)體外耐藥性評(píng)估和動(dòng)物模型驗(yàn)證功能。結(jié)果顯示，轉(zhuǎn)染后CIK細(xì)胞對(duì)化療藥物的耐受性顯著提升，同時(shí)維持抗腫瘤活性。研究為優(yōu)化腫瘤聯(lián)合治療方案提供了實(shí)驗(yàn)依據(jù)。引言腫瘤化療的療效常因多藥耐藥性（MDR）而受限，MDR1基因編碼的P-糖蛋白可通過(guò)外排藥物降低細(xì)胞內(nèi)藥物濃度。細(xì)胞因子誘導(dǎo)的殺傷細(xì)胞（CIK）作為一種過(guò)繼性免疫治療手段，在實(shí)體瘤治療中展...
3-19
摘要GAD65基因在神經(jīng)遞質(zhì)合成中具有重要作用，但其對(duì)神經(jīng)干細(xì)胞分化的調(diào)控機(jī)制尚不明確。GAD65過(guò)表達(dá)/敲低的神經(jīng)干細(xì)胞模型，結(jié)合體外分化誘導(dǎo)體系，系統(tǒng)分析了GAD65對(duì)細(xì)胞增殖、分化的影響。實(shí)驗(yàn)采用威尼德電穿孔儀進(jìn)行基因編輯，結(jié)合免疫熒光染色及qPCR技術(shù)檢測(cè)分化標(biāo)志物表達(dá)。結(jié)果表明，GAD65通過(guò)調(diào)控Wnt/β-catenin信號(hào)通路影響神經(jīng)干細(xì)胞向GABA能神經(jīng)元分化，為神經(jīng)退行性疾病治療提供了新思路。引言γ-氨基丁酸（GABA）是中樞神經(jīng)系統(tǒng)中重要的抑制性神經(jīng)遞質(zhì)，...
