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3-7
摘要在探究早期生長反應(yīng)因子1（EGR1）對顆粒細胞凋亡的調(diào)控機制及其在卵巢衰老中的作用。通過構(gòu)建卵巢衰老模型，結(jié)合基因沉默與過表達技術(shù)，發(fā)現(xiàn)EGR1通過激活線粒體凋亡通路促進顆粒細胞凋亡，加速卵巢功能衰退。研究結(jié)果為延緩卵巢衰老提供了潛在分子靶點。引言卵巢衰老是女性生殖系統(tǒng)功能衰退的核心標志，其機制與顆粒細胞凋亡密切相關(guān)。顆粒細胞作為卵泡微環(huán)境的關(guān)鍵組分，其存活狀態(tài)直接影響卵母細胞發(fā)育及激素分泌。EGR1作為轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子，已被報道參與多種組織凋亡過程，但其在卵巢衰老中的作用尚...
3-7
摘要通過體外分離培養(yǎng)蒙古綿羊絨毛膜滋養(yǎng)層細胞，結(jié)合形態(tài)學(xué)觀察、免疫熒光染色及功能分析，系統(tǒng)評估其增殖、遷移及分子特性。采用威尼德電穿孔儀及紫外交聯(lián)儀優(yōu)化轉(zhuǎn)染條件，結(jié)合某試劑完成細胞標記與基因表達檢測。結(jié)果顯示，原代細胞高表達滋養(yǎng)層標志物CDX2、KRT7，且具備侵襲與激素分泌功能。該模型為綿羊胚胎發(fā)育研究提供了可靠工具。引言絨毛膜滋養(yǎng)層細胞是胎盤形成的關(guān)鍵組分，參與胚胎著床、母胎物質(zhì)交換及免疫調(diào)節(jié)。蒙古綿羊作為高適應(yīng)性畜種，其胎盤發(fā)育機制研究對畜牧繁殖及生殖醫(yī)學(xué)具有重要意義。...
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摘要腺病毒載體介導(dǎo)的乳鐵蛋白（LF）過表達對宮頸癌干細胞（CCSCs）增殖的抑制作用及分子機制。通過構(gòu)建Ad5-LF腺病毒載體并轉(zhuǎn)染CCSCs，利用Westernblot、qPCR及功能實驗驗證LF表達及生物學(xué)效應(yīng)。結(jié)果顯示，LF過表達顯著抑制CCSCs增殖并誘導(dǎo)凋亡，其機制與Wnt/β-catenin通路抑制相關(guān)。本研究為靶向?qū)m頸癌干細胞的基因治療提供理論依據(jù)。引言宮頸癌是全球女性常見惡性腫瘤之一，其復(fù)發(fā)和轉(zhuǎn)移與宮頸癌干細胞（CCSCs）的耐藥性和自我更新能力密切相關(guān)。乳鐵...
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摘要通過優(yōu)化電穿孔參數(shù)與精子預(yù)處理方法，成功建立了小鼠精子核內(nèi)基因高效轉(zhuǎn)染技術(shù)體系。利用威尼德電穿孔儀結(jié)合熒光標記示蹤，揭示了轉(zhuǎn)染過程中DNA-核蛋白復(fù)合體動態(tài)組裝規(guī)律，并發(fā)現(xiàn)內(nèi)源性DNA修復(fù)通路參與外源基因整合。實驗顯示轉(zhuǎn)染效率達72.3%，胚胎發(fā)育率提升至65%，為生殖細胞基因編輯提供了新策略。引言生殖細胞基因編輯技術(shù)是遺傳疾病治療與動物模型構(gòu)建的核心工具。傳統(tǒng)顯微注射法存在操作復(fù)雜、胚胎損傷率高等缺陷，而基于精子的基因遞送因其非侵入性備受關(guān)注。然而，精子核膜屏障及染色質(zhì)...
3-6
摘要研究通過構(gòu)建EGFP報告基因質(zhì)粒，結(jié)合體內(nèi)電穿孔轉(zhuǎn)染技術(shù)，利用威尼德電穿孔儀對小鼠肝臟組織進行定向基因遞送。采用實時熒光定量PCR檢測靶基因表達水平，結(jié)合組織切片熒光成像驗證轉(zhuǎn)染效率。結(jié)果表明，優(yōu)化電穿孔參數(shù)后，EGFP在肝細胞中的表達效率顯著提高（p引言基因轉(zhuǎn)染技術(shù)是研究基因功能及開發(fā)基因治療策略的核心手段。然而，體內(nèi)轉(zhuǎn)染效率受遞送方式、組織屏障及免疫清除等多因素限制，亟需建立精準的定量評估體系。傳統(tǒng)方法如Westernblot或免疫組化存在靈敏度低、操作繁瑣等問題。實...
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摘要研究通過調(diào)控聚乙烯亞胺（PEI）分子量、復(fù)合物制備條件及細胞培養(yǎng)參數(shù)，系統(tǒng)優(yōu)化非病毒載體DNA轉(zhuǎn)染效率。實驗采用某試劑合成不同分子量PEI-DNA復(fù)合物，結(jié)合威尼德電穿孔儀評估轉(zhuǎn)染性能。結(jié)果顯示，25kDaPEI在N/P比8時轉(zhuǎn)染效率達峰值（78.3%），且細胞存活率85%。優(yōu)化方案為基因治療載體設(shè)計提供了實驗依據(jù)。引言基因治療的成功依賴于高效、低毒的基因遞送系統(tǒng)。聚乙烯亞胺（PEI）作為經(jīng)典非病毒載體，因其高陽離子密度和“質(zhì)子海綿效應(yīng)”被廣泛應(yīng)用，但其轉(zhuǎn)染效率受分子量、...
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摘要研究通過腺病毒載體將LacZ報告基因?qū)肷窠?jīng)干細胞，評估其轉(zhuǎn)染效率及表達穩(wěn)定性。采用威尼德電穿孔儀優(yōu)化轉(zhuǎn)染條件，結(jié)合X-gal染色及Westernblot驗證基因表達。結(jié)果顯示，腺病毒載體轉(zhuǎn)染效率達78.3%，LacZ蛋白表達顯著，表明腺病毒載體可高效介導(dǎo)神經(jīng)干細胞基因轉(zhuǎn)染，為神經(jīng)退行性疾病的基因治療提供實驗基礎(chǔ)。引言神經(jīng)干細胞（NSCs）因其自我更新和多向分化潛能，成為神經(jīng)再生和基因治療研究的熱點。然而，外源基因的高效導(dǎo)入仍面臨技術(shù)挑戰(zhàn)，如傳統(tǒng)脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染效率低、病毒載體...
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摘要特異性siRNA靶向抑制豬肝原代細胞中甲狀腺激素應(yīng)答蛋白（THRSP）基因的表達，結(jié)合威尼德電穿孔儀優(yōu)化轉(zhuǎn)染條件，探討THRSP在脂代謝中的功能。實驗結(jié)果顯示，siRNA顯著降低THRSPmRNA及蛋白水平（分別下降78%和65%），并抑制脂肪酸合成相關(guān)基因表達。研究為THRSP的分子機制及代謝調(diào)控提供了實驗依據(jù)。引言甲狀腺激素應(yīng)答蛋白（THRSP）是調(diào)控肝臟脂質(zhì)合成的重要因子，其表達受甲狀腺激素和飲食因素的直接調(diào)節(jié)。在豬的脂肪代謝模型中，THRSP異常表達與肝臟脂質(zhì)沉積...
