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摘要為了建立穩(wěn)定表達(dá)谷胱甘肽過(guò)氧化物酶6（Glutathioneperoxidase6,GPx6）的真核表達(dá)細(xì)胞系，本研究對(duì)GPx6進(jìn)行基因克隆，構(gòu)建了慢病毒表達(dá)載體，并成功建立了表達(dá)豬源GPx6的CHO-K1細(xì)胞系。該研究成果為GPx6在豬繁殖力提高和精液稀釋液添加劑的應(yīng)用提供了新思路。引言谷胱甘肽過(guò)氧化物酶6（GPx6）作為抗氧化酶家族的重要成員，在生物體內(nèi)具有抗氧化和細(xì)胞保護(hù)的作用。近年來(lái)，GPx6在生殖健康領(lǐng)域的研究逐漸增多，尤其是在豬繁殖力提高方面展現(xiàn)出潛在的應(yīng)用價(jià)...
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摘要：本研究旨在探討肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子（hepatocytegrowthfactor,HGF）基因通過(guò)腎臟電轉(zhuǎn)染方法對(duì)大鼠腎缺血再灌注損傷（ischemia-reperfusioninjury,IRI）的保護(hù)作用。通過(guò)構(gòu)建hHGF基因表達(dá)載體，并利用威尼德電轉(zhuǎn)染系統(tǒng)將其導(dǎo)入大鼠腎臟，觀察其對(duì)腎功能、組織學(xué)改變及細(xì)胞凋亡的影響。結(jié)果表明，hHGF基因電轉(zhuǎn)染能有效減輕腎缺血再灌注損傷，為腎保護(hù)提供新的策略。引言腎缺血再灌注損傷是臨床腎臟移植、腎臟部分切除術(shù)及主動(dòng)脈瘤手術(shù)等過(guò)程中的常見(jiàn)...
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摘要本研究旨在探討山羊精子電穿孔轉(zhuǎn)染外源DNA的最適條件，并評(píng)估其對(duì)精子活力和轉(zhuǎn)染效率的影響。通過(guò)優(yōu)化電場(chǎng)強(qiáng)度、電擊時(shí)間和電擊次數(shù)等參數(shù)，確定了山羊精子電穿孔轉(zhuǎn)染外源DNA的最佳條件。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，在400V、200μs條件下電擊一次，精子活力和轉(zhuǎn)染效率顯著提高，為生產(chǎn)轉(zhuǎn)基因山羊奠定了基礎(chǔ)。引言基因轉(zhuǎn)移技術(shù)是現(xiàn)代生物技術(shù)的重要組成部分，尤其在動(dòng)物轉(zhuǎn)基因領(lǐng)域具有廣泛應(yīng)用。精子介導(dǎo)的基因轉(zhuǎn)移因其操作簡(jiǎn)便、成本低廉而受到廣泛關(guān)注。其中，電穿孔法作為一種高效的物理方法，能夠通過(guò)產(chǎn)生暫...
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摘要：本研究成功構(gòu)建了基于重組酶的大豆基因定點(diǎn)編輯系統(tǒng)，通過(guò)結(jié)合CRISPR/Cas9系統(tǒng)和重組酶技術(shù)，顯著提高了基因編輯的效率和精準(zhǔn)度。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，該系統(tǒng)能有效實(shí)現(xiàn)大豆基因的定點(diǎn)突變，并減少了脫靶效應(yīng)的發(fā)生。該系統(tǒng)為大豆遺傳改良和分子育種提供了新的技術(shù)手段，具有重要的理論和實(shí)踐意義。引言傳統(tǒng)的育種方法存在周期長(zhǎng)、效率低的問(wèn)題，且難以實(shí)現(xiàn)對(duì)特定基因的精準(zhǔn)編輯。近年來(lái)，基因編輯技術(shù)，特別是CRISPR/Cas9系統(tǒng)的出現(xiàn)，為大豆遺傳改良提供了新的途徑。然而，CRISPR/Ca...
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摘要：本研究旨在探討結(jié)核DNA疫苗通過(guò)肌肉注射聯(lián)合電轉(zhuǎn)染方法在增強(qiáng)免疫反應(yīng)中的效果。我們構(gòu)建了結(jié)核DNA疫苗質(zhì)粒，并通過(guò)威尼德電轉(zhuǎn)染設(shè)備對(duì)小鼠進(jìn)行免疫接種。結(jié)果顯示，該方法顯著提高了抗體滴度和T細(xì)胞反應(yīng)。本研究為結(jié)核DNA疫苗的高效遞送提供了新的策略，具有廣闊的應(yīng)用前景。引言結(jié)核?。═B）是一種由結(jié)核分枝桿菌（Mycobacteriumtuberculosis，Mtb）引起的慢性傳染病，是全球公共衛(wèi)生的重要威脅。盡管現(xiàn)有疫苗卡介苗（BCG）在一定程度上能預(yù)防兒童重癥結(jié)核病，但...
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摘要本文詳細(xì)探討了使用電穿孔法將重組桿狀病毒基因組轉(zhuǎn)染至昆蟲(chóng)細(xì)胞的過(guò)程。研究通過(guò)優(yōu)化轉(zhuǎn)染條件，比較了電穿孔法與脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染法的效率，并評(píng)估了子代病毒的感染能力。結(jié)果顯示，電穿孔法具有操作簡(jiǎn)便、周期短、成本低等優(yōu)點(diǎn)，為重組桿狀病毒在昆蟲(chóng)細(xì)胞中的高效表達(dá)提供了新的方法，具有廣闊的應(yīng)用前景。引言桿狀病毒表達(dá)系統(tǒng)是一種真核表達(dá)系統(tǒng)，具有高效表達(dá)目的蛋白的能力，并能對(duì)蛋白進(jìn)行修飾和加工，使其具備一定的生物學(xué)和免疫學(xué)活性。該系統(tǒng)在基因工程產(chǎn)品的生產(chǎn)中得到了廣泛應(yīng)用，尤其在昆蟲(chóng)細(xì)胞中，重組桿...
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摘要：本文詳細(xì)探討了電轉(zhuǎn)染技術(shù)下破損豬腎細(xì)胞的紅外光譜特性，通過(guò)構(gòu)建高效的電轉(zhuǎn)化體系，實(shí)現(xiàn)了外源基因的高效導(dǎo)入。實(shí)驗(yàn)采用紅外光譜技術(shù)對(duì)細(xì)胞損傷程度及基因表達(dá)進(jìn)行了監(jiān)測(cè)，結(jié)果顯示電轉(zhuǎn)染顯著改變了細(xì)胞的紅外光譜特征，為基因治療及細(xì)胞生物學(xué)研究提供了新的思路和方法。本文還深入討論了該研究的創(chuàng)新點(diǎn)及應(yīng)用前景。一、引言電轉(zhuǎn)染技術(shù)作為一種高效、便捷的基因?qū)敕椒ǎ诨蛑委?、?xì)胞生物學(xué)等領(lǐng)域得到了廣泛應(yīng)用。該技術(shù)通過(guò)短暫的高壓電場(chǎng)作用，使細(xì)胞膜發(fā)生可逆性穿孔，從而實(shí)現(xiàn)外源基因的導(dǎo)入。然而...
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摘要：本研究旨在將細(xì)胞電通透技術(shù)應(yīng)用于DNA肌肉轉(zhuǎn)染，通過(guò)優(yōu)化電場(chǎng)強(qiáng)度、脈沖時(shí)值和質(zhì)粒劑量等參數(shù)，實(shí)現(xiàn)高效電轉(zhuǎn)染。實(shí)驗(yàn)采用增強(qiáng)綠色熒光蛋白（EGFP）基因質(zhì)粒作為報(bào)告基因，注射到小鼠脛前肌后給予特定電脈沖，轉(zhuǎn)染率顯著提高。該方法為基因治療及體內(nèi)基因表達(dá)研究提供了新思路和應(yīng)用前景。引言綠色熒光蛋白（GFP）是一種來(lái)自水母的蛋白質(zhì)，具有更好的熒光性質(zhì)，能夠在特定波長(zhǎng)光的激發(fā)下發(fā)出綠色熒光。近年來(lái)，GFP被廣泛應(yīng)用于生物學(xué)研究中，特別是在轉(zhuǎn)基因動(dòng)物研究中得到了廣泛認(rèn)可。利用GFP基...
